在培養正常細胞中有一個特性就是,細胞隨著代數的增加生長速度會越來越緩慢甚至是死亡
我想請問一下有沒有什麼樣的實驗方法可以做出這樣的一條曲線出來
主要是要找出一株細胞的停至期是在第幾代
2007-03-28 17:55:26 · 3 個解答 · 發問者 星星戀曲 4 in 科學 ➔ 生物學
可以用 trypan blue 或是 MTT (MTS) 的方法去測出細胞生長的 doubling time
在每一代的細胞都去測量其 doubling time 的時間
就可以知道是否會隨著代數不同而生長減緩
一般如果是細胞株的話大約在繼代培養 20 代以內不會有太大差別
20代以後細胞特性會改變...生長也會變慢
如果是動物的初代細胞則大多無法繼代太多次
一般以2~3次為限
2007-04-03 20:41:19 · answer #1 · answered by yoyo 1 · 0⤊ 0⤋
去探討是否有無死亡狀況
最簡單的方法就是將你懷疑此代細胞死亡現象增多的細胞收集並 做 RNA EXTRACTION ==> REVERSE TRANSCRIPTION ==> 找幾個死亡的marker 去做 PCR==> run agarose gel
這是最簡單 最省的方法
曲線也可以從 agarose gel 去畫 不過通常如果要畫曲線 還是要有瑩光的抗體 看是要染還是要做細胞流質儀 (cytofluometer 好像是這樣拼的) 那電腦會自動幫你做出漂亮的圖 前題是你必須要有比較才能做出曲線圖 類似 每幾個代數比一次
要看停在第幾期也是要由 markers 去找
所以你要發時間 (其實很簡單 你只要打進去yahoo, google M 期 &marker) 就會出現一堆
然後你在用螢光抗體或引子去做PCR 就可以知道有跟沒有在那個期
2007-03-30 06:04:17 · answer #2 · answered by kaolp 5 · 0⤊ 0⤋
可以試試看養在well中
按時間點測吸光值
因為生長可能改變濁度
若有錯誤煩請指正喔~ ^ ^
2007-03-29 16:58:32 · answer #3 · answered by Anonymous · 0⤊ 0⤋