何謂 genomic DNA library 與 cDNA

Question

請問 genomic DNA library 與 cDNA library 它們各有哪些用途 ? 來自於哪裡 ? 而有什麼影響 呢?

Answer 1

genomic library包含了 基因整個DNA片段。 含有primer或是promotor等等~

而 cDNA library 則包含 來自細胞基因所表現的mRNA的complementary DNA
合成片段。


cDNA Library------------------

1. cDNA library的優點是它只有包含有被表現的基因序列(即exon)。
2. 在prepare 一個 cDNA library的第一個步驟就是要把我們有興趣的DNA片段所transcription出來的mRNA 分離出來。
3. 由於真核生物的 mRNAs 尾巴的部份有 poly-Al, 所以能夠很容易地被分離。 4. 然後利用反轉錄酶來合成互補的DNA片刻。
5. 之後把這一段新合成的單股DNA在 DNA polymerase的幫忙下合成變為雙股的DNA分子。
6. 做好的雙股線性 DNA分子再去與plasmid或是其他的vector(載體)轉殖入細菌胞內。
7. 最後進行 clone的動作。

Genomic Library

1. genomic library則是利用限制酶來切出我們所要的DNA片段(雙股DNA)。
2. 被切出的片段包括primer及intron等非表現序列。
3. 切出的序列同樣去做分離與應用vector 來做轉殖與clone。
~~~~~~cDNA library ~~優點~~
1. 不含intron的sequence，所以大量減少我們處理DNA的總量
(也就是被精簡化了)
2. 可以應用在特殊組織環境中。
~~~~genomic DNA library ~~~~~~~
含有primer及其他控制gene表現片段，無需另加pimer，相對處理上步驟較少
參考資料有圖.......