我要分析<樣品A>的濃度我利用下面2種方法,為什麼反推出來的樣品濃度有差異?方法1.製作減量線後,再打<樣品A>,由檢量線中反推<樣品A>的濃度,<樣品A>濃度約為63%方法2.未製作減量線,只打一個已知濃度的樣品,再打<樣品A>,由這2個樣品的peak area差距的比例,反推出<樣品A>濃度為69%為什麼這2種方法反推出來的<樣品A>濃度差距那麼大?
2006-08-28 15:42:56 · 2 個解答 · 發問者 Iris 4 in 科學 ➔ 化學
不是很清楚你的回答..
在方法一中,由檢量線反推未知濃度樣品,應該配製數個點,來製作檢量線,才能反推未知濃度ㄉ樣品,我做出來的樣品為63%,
我ㄉ問題是
為什麼以這2個方法反推的濃度差距那麼大?
WHY?WHY?
2006-08-28 19:13:20 · update #1
若依照好ㄉ檢量線具備條件的第五點
若做好檢量線後,打一個已知濃度的樣品來看檢量線是否正常,假設有誤差5%,那我所分析的樣品是否也要設為5%誤差值才是真正濃度?
我檢量線做5個點,但是濃度調整為24%.36%.48%.60%.75%這樣範圍會不會太大?
2006-08-29 04:14:55 · update #2
一條好的檢量線至少是能符合以下幾個要求
1.至少要5點標準品
2.標準品的濃度範圍盡量不要差異過大
3.做出來的檢量線要成線性,也就是說是要成一條直線,而不是拋物線
4.檢量線的R值或是R平方值能大於0.995(如果R平方值可以達到要求準確度越高)
5.檢量線作出來後,要去準備一已知濃度的樣品(必須是另外重新配置,不可拿做檢量線的STD)來確認檢量線是否正確
6.反推出來的樣品濃度必須是落在檢量線的濃度區間內,如過高於檢量線的濃度最高點,請將樣品稀釋重新注射分析;如果樣品濃度低於檢量線的最低點,請在檢量線多做一點低於您樣品濃度的STD或是將樣品濃縮使濃度落於檢量線濃度的區間
如果能符合以上需求,換算出來的濃度通常是不會有太大問題
接著來討論您的狀況,您用兩種方式來推斷樣品的濃度,
1.如果單純以方法來看,方法一的可信度較高,因為至少您在方法一是配置數點標準品來做檢量線,比較能確定濃度與Peak面積間的比例變化.而方法2中只拿一已知濃度所測得的面積來反推未知樣品的濃度,其實這也是做檢量線,只是做一點而已,而這條檢量線的方程式就是從0點畫一條線至您所謂的已知濃度的面積,但我們無法保證濃度與面積的比例關係是否相同於從0點畫一條線至您所謂的已知濃度的面積的斜率,因此誤差可能就會很大.
2.如果不以檢量線的點數來看的話,方法一的檢量線作出來後是否有符合上述幾個檢量線的要求呢?如果沒有,那推出來的濃度當然會有問題
3.以方法2來說,今天您所拿的已知濃度樣品,這個濃度適不適當可能也是必須注意的,因為只拿一點濃度所以我們無法得知線性變化,有可能會拿到超出線性範圍的濃度,這樣來反推可能就會有問題
4.不曉得您的偵測器是不是UV/VIS Detector(或是DAD),如果是的話不論是方法1或2盡可能不要讓樣品的吸光值超過1ABS(依樣品特性,有些會高一點,有些會低一點),這樣很容易造成非線性的狀況而導致數職不正確.
2006-08-29 10:35:26 補充：
1.理論上去檢測檢量線的誤差值後應該是要在所檢測出來的數據加上誤差值,但是好像也很少人真的會加上去,大部分覺得說如果差距不大就直接套用算出來的數據.2.濃度為24%.36%.48%.60%.75%範圍應該說還可以,但是還是要依照實際要隨著檢測的樣品濃度的不同來加以調整(就是盡量符合第6點).
2006-08-28 20:30:13 · answer #1 · answered by 祥仔 3 · 0⤊ 0⤋
檢量線範圍大小,會影響到精確度,所以你如果把檢量線範圍縮小到50%-70%就會比就接近.
未製作減量線的已知濃度的樣品,濃度與未知物濃度的差距也會影響
2006-08-29 19:28:13 補充：
你的樣品落在後方兩個標準品間,請你算前4個的標準品斜率和後4個標準品斜率差距有多大ㄧ般來說很少人用peak area比值的數據因為它的誤差大,說服力不夠
2006-08-28 16:43:10 · answer #2 · answered by LCH 6 · 0⤊ 0⤋