枯草桿菌的基本資料

Question

枯草桿菌的培養方法，要使用哪一種培養基 ，有何要特別注意的事項，等等......

Answer 1

本菌種為枯草桿菌(ATCC 6633)培養所得菌液，經加熱處理後之芽胞菌，以特殊明膠(Gelatine)等佐劑調製，乾燥製成之薄片菌種。

效 用：供生乳中抗生物質殘留檢驗用。

使用方法：

含菌種培養基之製備： 使用第1號抗生素培養基(Bacto Antibiotic medium 1)經加熱溶解及高壓滅菌(121℃．15分鐘)後，保持於56℃±0.5℃溫水浴槽中，每100ml培養基加入，乾燥菌片3片，充分搖動使菌片完全溶解均勻分散於培養基中，然後以滅菌吸管吸取分裝於已滅菌塑膠培養皿(底皿85±1mm)，每個培養皿分裝9ml，置於水平位置使之凝固，再以塑膠袋密封置於4℃冰箱中，於10日內用畢為宜。


自冰箱中取出之芽胞菌培養皿，應先放在37℃定溫箱，放置時應倒放(底皿在上)，並使底皿與蓋皿之間有空隙，以便水分蒸發。30分鐘後取出，迅速貼上已吸取被檢生乳之濾紙片，並應於10分鐘內完成，再置於37℃定溫箱中培養。


在當天生乳抗生物質檢驗之一批培養皿中，選出1個培養皿，放入0.05IU/ml及0.1IU/ml之青黴素濾紙各1片，做為對照。
判 定：

判定時間： 以培養後四小時為原則，但在3.5小時，4.0小時及4.5小時等三個時段，請加以觀察，再作最後判定。
制菌圈： 1mm(含)以上者判為陽性。

1mm(不含)以下者判為疑陽性。

完全無制菌圈者判為陰性。

疑陽性或對照不明顯者請重做。


保 存 法：

芽胞菌片瓶及青黴素濾紙片瓶打開取用後，須再栓緊並封臘。


保存於4℃冰箱或零下20℃ 冰櫃，請勿放在零下70℃冷凍櫃，以免玻璃瓶破裂。
包 裝：

枯草桿菌芽胞菌片：每瓶25片。


青黴素濾紙片：0.05IU/ml及0.1IU/ml每瓶均各裝30片。

2006-08-19 20:27:53 補充：
生物農藥枯草桿菌在植物病害防治上之應用http://www.tdais.gov.tw/search/book1/26/n26-8.htm點選看資料!!!

Answer 2

枯草桿菌之特性及拮抗範圍

　　桿菌屬(Bacillus spp.)細菌普遍存在於土壤及植物體表，本屬細菌中部份種類由於可產生 對植物病原真菌、細菌甚或有害昆蟲等具有毒害作用之抗生物質，因此常被加以研究並發展 應用於植物病害或虫害的生物防治上；其中如蘇力菌(Bacillus thuringiensi)，其所產生之一種 結晶蛋白對鱗翅目害虫的幼虫具有毒害作用，此一細菌已被大量培養並經商品化推廣應用於 實際虫害防治工作上多年，是本屬細菌應用在植物病虫害之生物防治上最成功的例子；在植 物病害防治上，本屬細菌常被研究應用的有B.subtilis、B.cereus、B.megaterium以及B.pumilus 等，其中尤以枯草桿菌B.subtilis在生物防治上之應用最具潛力。根據學者們多人之研究，可 被枯草桿菌拮抗抑制的植物病原菌種類包括有Alternaria solani、Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici、Monilinia fructicola、Penicillium digitatum、Rhizoctonia solani、Sclerotinia sclerotium、Uromyces phaseoli、Verticillium albo-atrum、V.dahliae、Pseudomonas solanacearum、 以及Xanthomonas campestris等，此種廣效性的抗生作用極適合應用於植物病害的防治上，這 方面的研究在國外已有諸多成功的例子。枯草桿菌在植物病害防治上的應用範圍極廣，包括 土壤病害、葉表病害(如菜豆銹病)、儲藏期病害(如桃褐腐病、柑橘青黴病)等，其中以土壤病 害方面有關之研究最多，值得一提的有康乃馨莖腐病(Fusarium oxysporum f.sp.dianthi)、洋蔥苗 腐病(Sclerotium cepivorum)、馬鈴薯炭腐病(Charcoal rot，由 Macrophomina phaseolina及 Botryodiplodia solanituberosi所引起)、楓樹維管束病害(Verticillium dahliae)、以及Olsen氏等在苗 期舞病(Rhizoctonia solani)防治上的應用，Turner氏等並發現以枯草桿菌處理花生種子，可促進 種子發芽、出土、固氮菌(Rhizobium spp.)的纏據、並抑制Rhizoctonia solani AG-4的感染，因而 促進根的生長，進而提高花生產量；此外本省Tschen 氏等在綠豆苗立枯病及其它Rhizoctonia solani 所引起的根部或莖基部病害防治上的應用等，效果亦相當卓著。而在本省有關枯草桿菌 於植物苗期病害防治，以吳氏及陳氏分別應用於菊花、聖誕紅等扦插苗苗期病害防治效果最 為顯著。

枯草桿菌之作用機制

　　枯草桿菌屬內有許多Bacillus spp.對植物病原真菌和細菌具有拮抗作用，此因枯草桿菌在 其代謝過程中，至少會產生66種不同的抗生素。會產生抗生素的枯草桿菌除可將菌體直接噴 灑植物葉片保護其免受葉部病害為害外，並可製成粉劑或純化出其抗生物質，進行種子覆被 或土壤處理。枯草桿菌屬產生的抗生物質為分子量範圍在270~4500 Da 間的胜呔類抗生素， 而同一種枯草桿菌常可同時產生分子量相近的多種抗生素，其組成結構為多個胺基酸以環狀 結構聯接，故其較不易被動植物的蛋白酸水解，本屬微生物產生抗生素的種類依其所在細胞 位置及分子結構可分為三類，分別為胞內環狀胜呔脂類 ( Intracellular cyclic peptido-lipids)、胞 外環狀胜呔脂類(Extracellular cyclic peptidolpids)及胞外胜呔環狀類 (Extracellular cyclic peptides) ，其所產生不同類之抗生素可對不同的病原菌產生抑制作用，如Cercospora kikuchii、 Verticillium dahliae、Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici、Alternaria mali 、 Rhizoctonia solani、 Pyricularia oryzea、Xanthomonas oryzea及Pseudomonas lachrymans拮抗範圍廣，為一具生物農藥 發展潛力的菌種。