關於HPLC之peak出現先後順序的依據

Question

我現在使用的是逆相HLPC
column是C-18
想請問一下各位
它的peak出現的先後順序的依據是什麼?
是極性的大小嗎?
那是何者先出來?
出來的順序跟我所使用的移動相有關係嗎?

Answer 1

column是C-18 peak出現的先後順序的依據極性的大小極性大的先出來C-18 的分離依據兩原理:1. 疏水性作用(Non-polar Hydrophobic interaction)如 Like dissolves like  原理般 較非極性物質 與C-18 上的長碳鏈有更大的疏水性效應 較被滯留2. 溶劑(移動相)疏水效應(Solvophobic Effect)Solvent partition 水多時，其較大之表面張力將推sample 入固定相中 當該分子溶於含水移動相時，若親水傾向不明顯，被含水移動相排斥，則該分子之疏水部份則更有會被排擠至像刷子般18個碳之(C18)官能基進行分配作用若移動相含水比例升高，solvophobic effect 增加，則更多機會於C18之partition分配作用所以滯留時間延遲與較多水之比例成正比關係當移動相為100%甲醇時，分析物幾乎被全部溶洗帶出 因 沒有與C18遂行分配作用出來的順序跟我所使用的移動相有關係嗎? 順序大致上不會差太大但有機溶劑比例升高 很可能所有樣品很快的同時出來沖提能力表或極性表http://home.planet.nl/~skok/techniques/hplc/eluotropic_series_extended.html以上參考建宏層析的層析實務編一書其網頁有一些很好的中文資料http://www.vercopak.com.tw/service01.htm