低極性的有機溶劑可以使蛋白質沉澱
為什麼??
它的原理是改變蛋白質的帶電性?
或是改變構形？ 或是搶走蛋白質分子間的吸引區域？(類似competitive inhibtion)
感謝指教!!
2005-11-10 06:50:00 · 1 個解答 · 發問者 Anonymous in 科學 ➔ 化學
2.4.2有機溶劑沉澱法 a. 降低水活性若在蛋白質溶液中加入有機溶液，如丙酮或乙醇，因 稀釋水濃度 而降低水活性，則蛋白質上親水性區域的水合度降低，開始聚集在一起，產生沉澱。 也可看作有機溶劑降低溶液的介電常數，使蛋白質的溶解度降低。應當注意，有些細胞膜上的蛋白質，本身含有很多疏水性區，在有機溶劑中反而易溶。 b. 使用有機溶劑要先把溫度降至零度左右，緩緩加到蛋白質溶液中，並一邊攪拌使生沉澱。 以丙酮為例，大多以 20-50% (v/v) 濃度來沉澱蛋白質；注意其中的 v/v 乃指加入前的体積；因丙酮與水混合後，体積會稍微縮小。溶液中若有高濃度鹽類，則會影響沉澱行為，以 0.05-0.2 M 離子強度為限度。 c. 沉澱收集此法所得的沉澱粒子較大，以重力沉降即可收得沉澱，但一般仍以離心收集，以增加回收，並可去除丙酮。蛋白質沉澱可涼乾，或在布氏漏斗中以少量乙醚洗過製成粉末；所得沉澱中的有機溶液並不多，通常並不影響下一步驟。
圖片參考：http://juang.bst.ntu.edu.tw/ECX/images/F2.5.gif
圖 2.5 有機溶劑沈澱法的原理圖解 以後有關蛋白質純化的問題可以去這個網址找方法喔也可以來信跟我討論^^
2005-11-10 11:24:02 · answer #1 · answered by Anonymous · 0⤊ 0⤋