１．要怎麼清洗HPLC的管柱,可以詳細說明步驟嗎？
安裝HPLC的人是說,先用水洗,再以acetonitrile洗,隔天以流動相做
但是我不清楚我應該如何下手..
２．洗針的液體和流動相是一樣的嗎？都是６０：４０的acetonitrile：水嗎？
2005-11-05 04:51:55 · 3 個解答 · 發問者 Anonymous in 科學 ➔ 化學
我所知道HPLC的流動相為60:40的acetonitrile:水
這樣是否為逆向層析法??
2005-11-05 11:30:58 · update #1
你說:直接就是將壓縮 pump 的輸入管直接放入 RO 水中,經過一段時間，再將 RO 水換成 acetonitrile 即可。隔天再以要做實驗的流動相再沖洗一段時間，就可以開始做實驗了！
請問喔:
將 RO 水換成 acetonitrile ,acetonitrile是純的acetonitrile,還是
60:40的acetonitrile:水??
2005-11-05 11:41:45 · update #2
要怎麼清洗HPLC的管柱,可以詳細說明步驟嗎？安裝HPLC的人是說，先用水洗，再以acetonitrile洗，隔天以流動相做但是我不清楚我應該如何下手？ 我的碩士論文就是做HPLC的分析，通常如果是逆相的HPLC的管柱，就是用水或 acetonitrile 來沖洗。直接就是將壓縮 pump 的輸入管直接放入 RO 水中，經過一段時間，再將 RO 水換成 acetonitrile 即可。隔天再以要做實驗的流動相再沖洗一段時間，就可以開始做實驗了！這是逆相的HPLC的管柱才是用這樣子的方法沖洗，但如果是正相的管柱，就不是這樣子做了，好像就另有另的做法，請你先自己去問清楚。洗針的液體和流動相是一樣的嗎？都是６０：４０的acetonitrile：水嗎？ 所謂的”洗針的液體”是洗注射器的液體嗎？如果是，可以使用和流動相一樣的溶劑，也可以使用 acetonitrile 來清洗；但仍強調這是逆相的管柱。如果是正相管柱，好像是使用正己烷，還是請你自己去查清楚！
2005-11-05 08:30:33 · answer #1 · answered by Frank 7 · 0⤊ 0⤋
如果您所說的洗針液體是指如何清洗注射針的話,那就不一定是需要跟您的移動相相同,建議您洗針的液體是選擇可以溶解您樣品的溶液,這樣才能把注射針清潔乾淨,避免污染到下一個樣品的注射,因而影響到數值的準確性.如果您是使用Autosampler,洗針液除了考慮溶解度外,請勿使用鹽類溶液,因為使用鹽類溶液易造成Autosampler的結晶造成機械零件的磨損.
2006-04-28 22:42:53 補充：
如果從您的敘述您的column應該是逆相的column,一般整個分析如果完成後,建議您最好都養成清潔coluum的動作,但是如果column用100%的水先清洗到是不一定需要,因為用水清洗column其實是蠻傷的,如果可以就直接以您的移動相清洗column後再以column的保存溶液沖洗存放即可,但是您的樣品或是您的移動相中是含有鹽類的話,雖然水會傷害還是必須先用來清洗column,這樣才能先將鹽類洗乾淨,最後用甲醇或乙睛沖洗,最後再以column的保存溶液沖洗存放,隔天操作
時再以您的移動相平衡即可.
2006-04-28 18:28:01 · answer #2 · answered by 祥仔 3 · 0⤊ 0⤋
HPLC的流動相為60:40的acetonitrile:水所用的管柱一定是逆向層析法(reverse phase chromatography) 正向層析法不用水 只用有機溶劑１．要怎麼清洗HPLC的管柱,可以詳細說明步驟嗎？ 安裝HPLC的人是說,先用水洗,再以acetonitrile洗,隔天以流動相做若是新的管柱會在說明書上標明送貨前在什麼 solvent 一般是在 50% 甲醇 或 50% acetonitrile 一般來說不用清洗 若是用60% acetonitrile 作移動相的話 只要將配好的 solvent 抽氣過濾 便可立即用 極性差不多清洗管柱是不得已手段 原因是曾用過多次 有不溶雜質卡在管柱內 因此分離效果變差 或是有 ghost peak 出現才做方法:管柱與 DETECTOR 連接先拆開 (洗時不用連上detector)Column size: 125x4mm; wash volumn: 15 mlColumn size: 250x4mm; wash volumn: 30 ml依以下次序: 1. 100%水 2. 100%Acetonitrile或 甲醇 3. 100%THF 4. 100% Acetonitrile或 甲醇 5. 100%水 6. 將要用的流動相(如60:40的acetonitrile:水 )２．洗針的液體和流動相是一樣的嗎？都是６０：４０的acetonitrile：水嗎？注射針的洗液可用 任何溶劑如 Acetonitrile或 甲醇或DMSO 但需注射進廢液瓶中 用什麼溶檢測樣品便用那溶劑洗請參考http://www.chromatography.co.uk/TECHNIQS/hplc/columns3.htmhttp://www.chromatography.co.uk/TECHNIQS/Default.htm
2005-11-05 11:54:19 · answer #3 · answered by Yy 7 · 0⤊ 0⤋